世界から認められたスクリーニングシステム。 高感度、高い安定性、1536分注、発光測定にも対応！ FDSS (Functional Drug Screening System) シリーズ は、複雑な生体内シグナル伝達を光学的に検出し、新薬やリード化 合物を発見するために有効なスクリーニング装置です。 FDSS7000EXは、1536分注、蛍光/発光アッセイ両対応、複 数洗浄槽など多彩な機能を搭載した最上位機種です。さまざまな 浮遊細胞、接着細胞のリアルタイムカイネティクス解析が可能です。 また、オプションパーツの組み合わせにより、ロボット接続による測 定や細胞内カルシウム測定、FRET測定など、ユーザーの目的に合 わせた専用の全自動測定システムの構築も可能です。 アプリケーション 細胞内カルシウムイオンアッセイ 細胞膜電位アッセイ 各種イオンチャネルアッセイ イクオリンアッセイ ルシフェラーゼアッセイ FRETアッセイ 浮遊細胞にも対応 アプリケ ーション 全ウエル同時分注・同時測定によるハイスループットを実現 細胞内カルシウムイオンアッセイ イクオリン、Fluo-3、Fura-2の受容体発現細胞を使用したカルシウム変化の比較 0.7 3 5.9 pM 19.68 pM 12000 10000 8000 6000 4000 2.5 65.61 pM 0.6 218.7 pM 2 Ratio Fluorescence (RFU) Luminescence (RLU) 14000 729 pM 0.5 2.43 nM 1.5 8.1 nM 27 nM 0.4 1 90 nM 2000 300 nM 0 0.5 0 25 51 76 101 126 0.3 0 25 Time(sec) ▲イクオリン 50 76 101 Time(sec) ▲Fluo-3 126 0 25 50 76 101 126 1 μM Time(sec) ▲Fura-2 細胞膜電位アッセイ Fura-2AMと膜電位蛍光試薬によるマルチプレクスアッセイ 膜電位とカルシウムの動きを並行して測定したマルチプレクスアッセイの例です。 FMPでは480 nm励起/540 nm蛍光、Fura-2では380 nm励起/540 nm蛍光をそれぞれ交互に測定 し、両方の動きを並行して測定した一例です。 ・Fura-2AM：ex380 / em540 ・膜電位：ex480 / em540 ▲リガンドによるカルシウムおよび 膜電位のレスポンスカーブ ▲一定のリガンド濃度における、3種類のアンタゴニストの濃度変化に伴う カルシウムの動き イオンチャネルアッセイ 一次神経培養細胞の各種イオンチャネル、レセプターにおけるカルシウム振動 Involvement of various ion channels and receptors in Ca 2+ oscillations Presented at the 8th FENS Meeting - Amsterdam - July 3-7, 2010 Session 015 Epilepsy 1, n˚015.36 2 高感度発光センサでは、極低濃度範囲のシグナルも検出可能です。 ・細胞：CHO ・基質：h-CTZ ・試薬：ATP ・測定時間：測定開始10秒後にリガンドを分注。 1秒間隔で、1分30秒間の測定。 RLU (Max) イクオリンアッセイによるドーズレスポンスの比較 未処理 未処理 0.3 nM 3 nM 0.3 nM 3 nM 30 nM RLU (Max) イクオリンアッセイ 30 nM Time(sec) Time(sec) ▲蛍光/発光センサ ▲高感度発光センサ Cell: U937 ルシフェラーゼアッセイ (10 μg/ml Mitomicin-C induced Apoptosis) 5000 cells/well ∼ 20 cells/well KIT: Bright-GloTM Luciferase Assay System (Promega E2610) (25 μl per well for 384 black microplate) R KIT : Caspase-Glo Assays (Promega G8090) 20 μl per well for 384 black microplate 10 min incubation at RT Add 25 μl reagent to 25 μl medium containing cells for 384 black microplate 30 min incubation at RT FRETアッセイ クマリン系色素(CC2-DMPE)とオキソノール系色素（DISBAC）による蛍光エネルギー移動(FRET) 【FRET VSP データ】 励起光 蛍光 460 nm 励起光 Vm Donor 蛍光 580 nm エネルギー移動 Emission Ratio = Donor Donor (CC2-DMPE) Emission (460 nm) Acceptor Acceptor (DISBAC) Emission (580 nm) 脱分極 状態 Acceptor 休止 状態 浮遊細胞 浮遊細胞をイクオリンアッセイでCTZ濃度を変えて測定した一例です。 Neurotransmitterで刺激されるGPCRを発現させた遺伝子組み換えCHO細胞を、1wellに10 000細胞分注しました。 基質濃度1 μM、2 μM、5 μM、10 μMで4時間ローディングした細胞を、内因性のリガンドであるATPとACHで刺激しました。 【ATP】 【ACH】 3 主要ハ ードウエア 信頼性の高い液体ハンドリング ／ 用途に合わせて選択可能なセンサ ■ディスペンサ 様々な分注ヘッドの搭載が可能 ● ● ● ● ● 【ヘッド搭載例】 チップ交換可能な、96、384、1536分注ヘッドの選択が可能 384、1536ピンツールにも対応 本体内にチップの自動着脱機能搭載 標準で3種類、 プレート搬送ライン(後)を使用すれば最大4種類 の化合物を分注可能 分注ヘッドはユーザーが容易に交換可能 ピンツールヘッド 分注ヘッド (チップ用) ピンツールヘッド NEW 金属ピンをチップ状に配置し、先端に試薬を吸着させる ことで分注を行います。微量な溶液量の分注や繰り返し 使用が可能です。 2ヘッドディスペンサ チップ 粘性の高い試薬を使用時 2ヘッドを同時に搭載することでき、粘性の高い化合物や、アゴニスト/ アンタゴニストでのヘッドの使い分けが可能です。 ピンツールヘッドと併用 ヘッド ヘッド 1536 ヘッド 粘性 1 2 1536 チップ 粘性 チップ 1 2 1536 ピンツール ヘッド チップ は毎回チップを交換、 は通常の試薬分注用 ■プレートスタッカユニット ■洗浄ユニット 多彩な洗浄機能を搭載 20枚または50枚のプレートスタッカ機能 ● ● ● ● ● ● ● ● 最大3液まで対応し、キャリーオーバーの無い洗浄が可能 測定中にチップの洗浄が可能 超音波洗浄機能も使用可能 チップ先端の拭き取り機能搭載 洗浄槽 スタッカを利用することでロボットを使わなくても自動計測に対応 20枚または50枚を選択可能 セッティングが簡単なカセット方式 バーコードリーダを搭載可能 リスタッキング機能 NEW OUT 拭き取り台 IN 一度OUT側に出たマイクロプレート をIN側にすべて戻す機能を持った スタッカもご用意しています。 リスタッキング 測定 ■プレートミキシング ■その他 プレートミキシングによる安定したレスポンス検出 自動試薬供給機能 ● プレート全体に細かな振動を加えながら測定可能 ● 細胞と試薬のミキシングが効果的にすばやく行える ● 浮遊細胞を用いたアッセイなどにも効果的 デッドボリュームを大幅に低減した新試薬供給装置 も取り付け可能です。 Fluo-4アッセイにおけるプレートミキシング効果 NEW 温度調整機能 ヒーターユニットも搭載可能です。内部温度センサにより安 定的に温度を保ちます。 ▲ミキシング機能なし 4 ▲ミキシング機能使用時 ■蛍光発光センサ・蛍光光学系 蛍光アッセイ、発光アッセイに1つのセンサで対応 高感度発光センサと組み合わせも可能 ● ● ● ● NEW 従来の蛍光センサに比べ蛍光の検出感度が飛躍的に向上 励起光を抑えることが可能なため、励起光源の購入費用も低減 高感度に加え、高ダイナミックレンジを実現 蛍光切替え装置によりFRET測定が可能 * 従来の蛍光センサも選択可能です。 H1 NFAT HEK293 Fluo-4 によるカルシウムイオン測定 EC50 H1 NFAT HEK293 BacMam Aequorinによるカルシウムイオン測定 Histamine 1.7305e-009 Na-Methylhistamine 1.0661e-006 Histamine 1.73 nM 19 0.66 Compound EC50 S/B ratio Z' EC50 Na-Methylhistamine 1.0 μM 25 0.67 Histamine 3.8659e-009 Compound EC50 S/B ratio Z' ※試薬・データ提供：米国 LifeTechnologies社 Na-Methylhistamine 3.8809e-006 Histamine 3.87 nM 142 0.84 Na-Methylhistamine 3.9 μM 182 0.68 ※試薬・データ提供：米国 LifeTechnologies社 2波長励起、2波長蛍光測定にも対応し 多彩なアッセイが可能 ● ● ● ● ● 落射蛍光光学系による優れた波長分離 接着細胞だけでなく浮遊細胞の測定にも対応 励起波長切り替え装置によるFura-2測定 (Dual Excitation 対応) 蛍光波長切り替え装置によるFRET測定 (Dual Emission 対応) 最大2枚のダイクロイックミラー、最大4枚の蛍光フィルタを 搭載可能 UV Blue Green Fura-2(Ca2＋) Fluo-3 YFP SBFI(Na＋) Calcium Green JC-1 PBFI(K＋) Sodium Green CoroNaRed 白色光源とフィルタの選択により 様々な励起波長に対応 MQAE, DiH-MZA(Cl−) CoroNa Green Rohd-2 DAPI(DNA) BCECF Rohadamine ● ● ● ● ● VSP-1(FRET) GFP FMP Xeランプを用いた高輝度白色光源 2000時間の長寿命 150 W、300 W、600 Wから選択 プレート全面の均一な励起照明 最大6枚の励起フィルタを搭載可能 FIT Di-8-ANNEPS ■高感度発光センサ ゲート機能を搭載し、発光測定でのダイナミックレンジを向上 蛍光/発光センサで取得できない微弱な信号も取得できる高感度発光センサも ご用意しています。新たにゲート機能も搭載し、 光量の多いサンプルにも対応可能となりました。 蛍光/発光センサと組み合わせることにより、 さらに広範囲の発光信号に対応します。 発光量 微弱 弱 中 高感度発光センサ ＋ ゲート機能 蛍光/発光センサ NEW ゲート機能 【NDフィルタ】 【ゲート機能】 計測可能！ 信号 ノイズ ゲート有り ゲート無し RLU 光量が多いサンプルでは、通常、減光フィルタ (NDフィルタ)が用いられますが、その場合、信号だけが 減衰するためS/Nが悪くなります。 一方、ゲート機能の場合には信号もノイズも両方ゲート するため、減光率で比べてS/Nが有利になります。 saturation 減光後 減光後 光量 5 解析ソフトウエア 簡単操作で各種アッセイを実行可能 ■基本操作 ①3つのモードから選択 【測定モード】 アッセイを行うモードです。プロ トコルを設定し、アッセイを開始 します。 【マニュアルモード】 装置の一部の機能を手動で動作させるモード です。動作確認などで使用します。 ▲カメラ/励起フィルタ制御 【閲覧モード】 測定したデータを確認するモー ドです。保存されたデータを呼 び出します。 ▲ライブイメージ画像 ②条件設定 アッセイプロトコル設定 ● 分注、測定、洗浄などの条件を設定、記録 ● 測定からデータ出力までの自動運転が可能 ディスペンサ設定 ● 分注時のチップ高さ、スピード、 チップミキシングを調整 ● プレートミキシングを設定 ③出力結果 測定 / 解析 ● 全ウエルのカイネティックデータ、拡大グラフ、 相関図、解析結果の表示 ● 多彩な解析機能や出力機能を搭載 【データ解析】 ・生データ出力 ・Positive control ・解析データのテキスト出力 ・Subtract bias ・グラフのビットマップ保存 ・Spatial uniformity ・ピーク計算 ・ヒット判別 ・IC/EC計算機能 ▲解析画面 6 【データ出力】 ・Negative control ■詳細設定 アッセイプロトコル設定 ● １プロトコルで最大4000サンプリング可能 ● 2つのサンプリング間隔を交互にシーケンス可能（最大3回） グラフ描画設定 補正設定 解析設定 解析範囲 タブ選択により多彩な設定が可能 ディスペンサ設定 ● 分注量、スピード、など細かな設定が可能 ● 洗浄の設定、チップによる混ぜ込み（Trituration)なども設定できます。 1プロトコル内で最大4分注可能！ 分注④ 分注③ 分注② 分注① 7 システム構成例 フレキシブルなシステム構成で様々なニーズに対応 ①蛍光測定 (最小構成) Fura-2、Fluo-3、Fluo-4等の蛍光色素を用いたCaイオンアッ K＋、 Cl−、 pHなど各種イオンチャネルのアッ セイをはじめ、 Na＋、 セイに対応できます。 オプションを追加することで多彩 なシステム構築も可能です。 FDSS7000EX本体 洗浄ユニット リガンド プレート ヘッド バーコード プレート スタッカ リーダ OUT IN ・励起光源 ・蛍光センサ 搬送ライン(前) チップ ②蛍光/発光測定 蛍光/発光センサを選択することで、蛍光アッセイに加え、発 光アッセイにも対応可能です。 また、蛍光切り替え装置を追加 することにより、FRET測定など に対応します。 FDSS7000EX本体 洗浄ユニット リガンド プレート ヘッド バーコード プレート スタッカ リーダ OUT IN ・励起光源 ・蛍光/発光センサ 搬送ライン(前) チップ ※微弱な発光検出には、より高感度な高感度発光センサをご利用ください。 ③FRET測定 VSP-1、PremoTM 等のFRETプローブによる細胞膜電位 測 定 や F I C R h R などの 蛍 光 色 素 を 用 い た c A M P 測 定 、 Fura-2/CoroNaRedを用いた Caイオン/Naイオン測定(マルチ プレキシングアッセイ)、蛍光タン パク質GFP/DsRedを用いたデ ュアルレポータージーンアッセイ など、2つの異なる蛍光波長を同 時に測定するようなアッセイに利 用できます。 FDSS7000EX本体 洗浄ユニット リガンド プレート ヘッド バーコード プレート スタッカ リーダ OUT IN 搬送ライン(前) チップ ・励起光源 ・蛍光/発光センサ (または蛍光センサ) ・蛍光切り替え装置 【蛍光切り替え装置 A8472-04】 蛍光フィルタとダイクロイックミラーの自動切り 替えを行う装置です。 2波長の蛍光を扱うFRETやVSPなどのアッセ イを行う場合に使用します。 FDSS7000EX本体 FDSS7000EX本体 DM1 DM2 DM1 DM2 回転式の蛍光フィルタで 取得波長を変更 ダイクロイック ミラー フィルタ切り替え時間 * 0.3 秒 ダイクロイックミラー搭載数 最大2枚 蛍光フィルタ搭載数 * 隣り合うフィルタ間の切り替え時間 8 最大4枚 蛍光フィルタ センサ センサ コントローラ コントローラ ④蛍光/発光測定 (4試薬分注構成) プレート後搬送ラインを追加することにより、標準である3種 類の試薬槽に加えて、プレートからのリガンド/化合物分注を 追加することができ、あわせて4種 類の試薬を分注することが可能で す。また、そのプレートを中に留め 置いて次のプロトコルで使用する なども可能です。 FDSS7000EX本体 バーコード プレート スタッカ リーダ 洗浄ユニット OUT リガンド プレート ヘッド IN 搬送ライン(後) バーコード プレート スタッカ リーダ ・励起光源 ・蛍光/発光センサ OUT IN 搬送ライン(前) (または蛍光センサ) ・蛍光切り替え装置 (FRET測定時) チップ ⑤高感度発光測定 世界最高感度のセンサを搭載した発光測定システムです。 イクオリンを発現させた細胞内機能解析やルシフェリン・ル シフェラーゼ反応などによる高感 度レポータージーンアッセイ、高感 度を生かしたタンパク質相互作用 解析(Two-hybrid)、発光量が予 測できない実験などに最適です。 FDSS7000EX本体 バーコード プレート スタッカ リーダ 洗浄ユニット OUT IN 搬送ライン(後) リガンド プレート ・高感度発光センサ ヘッド チップ ⑥蛍光/高感度発光測定 96、384、1536ウエルプレートを用いた多種多様な蛍光 アッセイ、発光アッセイに対応する、Cell-based kinetic assayの結集品です。 FDSS7000EX本体 バーコード プレート スタッカ リーダ 洗浄ユニット OUT リガンド プレート ヘッド IN 搬送ライン(後) バーコード プレート スタッカ リーダ OUT IN 搬送ライン(前) ・高感度発光センサ ・励起光源 ・蛍光/発光センサ (または蛍光センサ) ・蛍光切り替え装置 (FRET測定時) チップ ロボット接続にも対応 お手持ちのロボットシステムと連結したアッセイにも対応します。 ①ロボットシステムからプレート搬送アームへマイクロプレートを受け渡し FDSS7000EX 本体 ①③ ②ロボットシステムの制御信号により測定を開始 ③測定終了後、ロボットシステムがプレート搬送アームからマイクロプレートを回収 【接続実績メーカ】 データ 解析装置 ② Thermo Scientific, Beckman Coultier, HighResBiosolution, Hamilton, Agilent 9 システム構成例 豊富なオプションパーツにより目的に合わせたシステムアップが可能 ■構成品 分注ヘッド 1台または2台から選択可能 チップの自動着脱機能搭載 96 chチップ式分注ヘッド(10−200 μl) A10118-24 384 chチップ式分注ヘッド(1−30 μl) A10118-26 1536 chチップ式分注ヘッド(1−5 μl) A10118-28 ピンツールヘッド 384ピンツールヘッド ショートピン用 A10118-30 384ピンツールヘッド ロングピン用 A10118-31 1536ピンツールヘッド ショートピン用 A10118-27 1536ピンツールヘッド ロングピン用 A10118-29 洗浄ユニット A10118-47 追加用洗浄ユニット A10118-48 洗浄槽パイプ板 96 ch A10118-44 洗浄槽パイプ板 384 ch A10118-43 洗浄槽パイプ板 1536 ch A10118-46 プレートスタッカユニット 蓋取り機能なし 前ライン A10118-04 プレートスタッカユニット 蓋取り機能なし 後ライン A10118-05 プレートスタッカユニット 蓋取り機能あり 前ライン A10118-94 プレートスタッカユニット 蓋取り機能あり 後ライン A10118-95 リスタック対応プレートスタッカユニット 前ライン A10118-07 リスタック対応プレートスタッカユニット 後ライン A10118-08 プレート手差し用アダプタ A10118-96 プレートスタッカカセット 20枚用 A10118-92 プレートスタッカカセット 50枚用 A10118-93 蛍光センサ、150 W高出力長寿命Xeランプ C10512-11 蛍光センサ、300 W (150 W×2) 高出力長寿命Xeランプ C10512-12 蛍光センサ、600 W (150 W×4) 高出力長寿命Xeランプ C10512-13 蛍光/発光センサ、150 W高出力長寿命Xeランプ C11653-11 蛍光/発光センサ、300 W (150 W×2) 高出力長寿命Xeランプ C11653-12 蛍光/発光センサ、600 W (150 W×4) 高出力長寿命Xeランプ C11653-13 チップ洗浄ユニット 1液洗浄(超音波洗浄付き)から 最大3液洗浄まで選択可能 自動拭き取り可能 スタッカユニット 蛍光センサユニット 蛍光/発光センサユニット *1 高感度発光センサユニット C10520-11 蛍光切り替え装置 A8472-04 バーコードリーダ A10118-50 試薬供給装置 A10118-55 温調機能 *1 *2 A10118-09 *1 蛍光/発光センサと温調機能を併用する場合は、水冷設備が必要となります。詳しくは弊社営業までお問い合わせください。 *2 温調機能は、納入時のみ選択可能です。 ■ 消耗品 ● チップ FDSS7000用/μCELL用96黒チップ、10ラック入り A8687-32 FDSS7000用/μCELL用384黒チップ、10ラック入り A8687-62 FDSS7000用1536黒チップ、10ラック入り A8687-52 ● 光学フィルタ ※最終ページに記載。 ■ 保守メンテナンス 装置を長期間安定してお使いいただくために、保守メンテナン ス契約をおすすめします。詳しくは弊社営業までお問い合わ せください。 10 ディスペンサ用 ■1536フォーマット 分注ヘッド A10118-28 チップ A8687-52 洗浄槽パイプ板 A10118-46 チップ A8687-62 洗浄槽パイプ板 A10118-43 チップ A8687-32 洗浄槽パイプ板 A10118-44 ■384フォーマット 分注ヘッド A10118-26 ■96フォーマット 分注ヘッド A10118-24 ■ピンツールヘッド (384/1536対応) ※ピン装着時の写真です。ピンは別途ご用意ください。 ポンプユニット 励起光源 励起ユニット (150 W) 励起ユニット (300 W) (600 W) ポンプユニット フィルタ切り替え装置 スタッカユニット プレートスタッカ 励起ユニット スタッカカセット フィルタ切り替え装置 11 システム構成例 豊富なオプションパーツにより目的に合わせたシステムアップが可能 ■ 消耗品 ● 光学フィルタ 標準 オプション アプリケーション 励起フィルタ 1 励起フィルタ 2 ダイクロイックミラー 蛍光フィルタ 1 蛍光フィルタ 2 Fura-2 (Ca2＋) 340 nm 387 nm UV 520 nm∼560 nm − SBFI (Na＋) 340 nm 387 nm UV 520 nm∼560 nm − PBFI (K＋) 340 nm 387 nm UV 520 nm∼560 nm − MQAE, diH-MQA (Cl−) 360 nm − UV 440 nm∼470 nm − DAPI (DNA) 360 nm − UV 440 nm∼470 nm − VSP-1 387 nm − VSP-1用 465 nm 565 nm CFP/YFP 438 nm − C/Y用 483 nm 542 nm Fluo-3, Fluo-4, Fluo-8 (Ca2＋) 472 nm − B 520 nm∼560 nm − Calcium Green (Ca2＋) 472 nm − B 520 nm∼560 nm − Sodium Green, CoroNa Green (Na＋) 472 nm − B 520 nm∼560 nm − BCECF (pH) 472 nm 450 nm B 520 nm∼560 nm − GFP 472 nm − B 520 nm∼560 nm − FITC 472 nm − B 520 nm∼560 nm − YFP 500 nm − Y用 542 nm − Di-8-ANNEPS 472 nm − B 645 nm long pass − JC-1 540 nm − JC-1用 570 nm∼600 nm − CoroNaRed (Na＋) 531 nm − FMP用 560 nm∼640 nm − Rhod-2, Rhod-3, Rhod-4 (Ca2＋) 560 nm − FMP用 590 nm∼650 nm − Rhodamine 560 nm − FMP用 590 nm∼650 nm − FMP 531 nm − FMP用 593 nm − *上表の波長の値は、各アプリケーションの一般的な励起/蛍光波長を示しています。フィルタ特性ではありません。 システム導入の際には、FDSS7000EXの光学系に適したフィルタを提供いたします。詳細はお問い合わせください。 ■ 外観寸法/質量/電源 本体 約1500 mm(W)×1030 mm(D)×1450 mm(H) 最大 約300 kg 100 V ∼ 230 V / 15 A (洗浄ポンプを含む) 600 mm(W)×700 mm(D)×1500 mm(H) データ解析装置 約50 kg 220 W 500 mm(W)×500 mm(D)×1200 mm(H) 洗浄ポンプ/タンク 約50 kg ■ 設置面積(最小スペース) 洗浄 ポンプ/ タンク 本体 光源 データ解析 装置 1300 mm スタッカユニット 2800 mm ★FDSS は浜松ホトニクス（株）の登録商標です。 Windowsは米国Microsoft Corporationの米国およびその他の国における登録商標です。 その他記載商品名、 ソフト名等は各社の商標または登録商標であることを明記し、カタログ上での表記は、省略させていただきました。 ※本カタログの掲載内容は、2014年12月現在のものです。本内容は改良のため予告なく変更する場合があります。 www.hamamatsu.com □ システム営業推進部 〒431-3196 浜松市東区常光町812 TEL (053)431-0150 FAX (053)433-8031 E-Mail [email protected] □ □ □ □ □ □ 仙台営業所 筑波営業所 東京営業所 中部営業所 大阪営業所 西日本営業所 TEL TEL TEL TEL TEL TEL (022)267-0121 (029)848-5080 (03)3436-0491 (053)459-1112 (06)6271-0441 (092)482-0390 FAX FAX FAX FAX FAX FAX (022)267-0135 (029)855-1135 (03)3433-6997 (053)459-1114 (06)6271-0450 (092)482-0550 Cat. 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